CUT-Tag互作技術(shù)服務(wù)-研究DNA與蛋白互作（Cleavage Under Targets and Tagmentation）是研究DNA與蛋白互作的新技術(shù)。與ChIP-Seq相比，CUT&Tag不需要甲醛交聯(lián)和免疫共沉淀的過(guò)程，而是通過(guò)靶蛋白的抗體和Protein A的介導(dǎo)，使Protein A融合的Tn5轉(zhuǎn)座酶靶向并切割DNA，同時(shí)在序列兩端加上測(cè)序接頭，經(jīng)PCR擴(kuò)增后形成高通量測(cè)序文庫(kù)。

（CUT-Tag互作技術(shù)服務(wù)-研究DNA與蛋白互作）實(shí)驗(yàn)流程圖

細(xì)胞與ConA beads結(jié)合——細(xì)胞滲透性處理——一抗與目的蛋白特異性結(jié)合——二抗結(jié)合一抗放大信號(hào)——加入pA-Tn5與抗體結(jié)合——通過(guò)Mg2+激活轉(zhuǎn)座體，片段化目的蛋白結(jié)合的DNA，并加上接頭序列——DNA提取與擴(kuò)增-高通量測(cè)序

使用CUT&Tag，鑒定H3K27me3在染色質(zhì)水平上的peaks。與ChIP-seq相比，在相同Reads條件下，兩者的Peaks一致，并且CUT&Tag的信噪比更高、背景更低。

參考文獻(xiàn)：

Kaya-Okur HS, Wu SJ, Codomo CA, Pledger ES, Bryson TD, Henikoff JG, Ahmad K, Henikoff S. CUT&Tag for efficient epigenomic profiling of small samples and single cells. Nat Commun. 2019 Apr 29;10(1):1930. doi: 10.1038/s41467-019-09982-5.